ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗 - undefined - 《药典三部

　　本品系分别用A群、C群、Y群、W135群脑膜炎奈瑟球菌培养液，分别提取和纯化A群、C群、Y群、W135群脑膜炎奈瑟球菌多糖抗原，混合后加入适宜稳定剂后冻干制成。用于预防A群、C群、Y群、W135群脑膜炎奈瑟球菌引起的流行性脑脊髓膜炎。

　　1 基本要求

　　生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。

　　2 制造

　　2.1 菌种

　　生产用菌种为A群脑膜炎奈瑟球菌CMCC 29201（A4）菌株、C群脑膜炎奈瑟球菌CMCC 29205（C11）菌株、Y群脑膜炎奈瑟球菌CMCC 29028菌株、W135群脑膜炎奈瑟球菌CMCC 29037菌株或其他经批准的菌种。

　　2.2 原液

　　2.2.1 混合前单价多糖原液

　　A群、C群、Y群、W135群脑膜炎奈瑟球菌多糖原液应分别符合“A群脑膜炎球菌多糖疫苗”中2.1~2.2项的规定。原液制备过程中可采用经批准的方法去除细菌内毒素。

　　2.2.2 原液检定

　　按3.1项进行。

　　2.2.3 保存及有效期

　　粗制多糖、精制多糖原液或原粉于-20℃以下保存。自收获杀菌之日起，疫苗总有效期应不超过60个月。

　　2.3 半成品

　　2.3.1 配制

　　用适宜稀释剂稀释原液。每1次人用剂量含A群多糖50μg、C群多糖50μg、Y群多糖50μg、W135群多糖50μg，可加适量乳糖等。

　　2.3.2 半成品检定

　　按3.2项进行。

　　2.4 成品

　　2.4.1 分批

　　应符合“生物制品分包装及贮运管理”规定。

　　2.4.2 分装及冻干

　　应符合“生物制品分包装及贮运管理”规定。冻干过程中制品温度应不高于30℃，真空或充氮封口。

　　2.4.3 规格

　　按标示量复溶后每瓶0.5ml。每1次人用剂量0.5ml，含A群、C群、Y群、W135群多糖各50μg。

　　2.4.4 包装

　　符合“生物制品分包装及贮运管理”规定。

　　3 检定

　　3.1 原液检定

　　3.1.1 鉴别试验

　　采用免疫双扩散法（通则3403）（

（通则3403）），本品与A群、C群、Y群及W135群脑膜炎球菌抗体应形成明显沉淀线。

　　3.1.2 化学检定

　　3.1.2.1 固体总量

　　依法测定（通则3101）（

（通则3101））。A群多糖于50℃干燥至恒重，C群、Y群、W135群多糖于50℃或105℃干燥至恒重。

　　3.1.2.2 蛋白质含量

　　A群多糖和C群多糖均应小于8mg/g，Y群多糖和W135群多糖均应小于10mg/g（通则0731第二法（

通则0731第二法））。

　　3.1.2.3 核酸含量

　　3.1.2.4 O-乙酰基含量

　　A群多糖应不低于2.0mmol/g，C群多糖应不低于1.5mmol/g，Y群、W135群多糖均应不低于0.3mmol/g（通则3117）（

（通则3117））。

　　3.1.2.5 磷含量

　　A群多糖应不低于80mg/g（通则3103）（

（通则3103））。

　　3.1.2.6 唾液酸含量

　　以N-乙酰神经氨酸为对照，C群多糖应不低于800mg/g，Y群、W135群多糖均应不低于560mg/g（通则3102）（

（通则3102））。

　　3.1.2.7 多糖分子大小分布测定

　　A群、C群、Y群、W135群多糖分子的KD值均应不高于0.40。KD值小于0.5的洗脱液多糖回收率：A群多糖应大于76%，C群、Y群、W135群多糖应分别大于80%（通则3419）（

（通则3419））。

　　3.1.2.8 苯酚残留量

　　A群、C群、Y群、W135群多糖均应不高于6.0mg/g（通则3113）（

（通则3113））。

　　3.1.3 无菌检查

　　依法检查（通则1101）（

（通则1101）），应符合规定。

　　3.1.4 细菌内毒素检查

　　依法检查（通则1143）（

（通则1143）），A群、C群、Y群、W135群多糖均应不高于12.5EU/μg。

　　3.2 半成品检定

　　无菌检查

　　依法检查（通则1101）（

（通则1101）），应符合规定。

　　3.3 成品检定

　　3.3.1 鉴别试验

　　按3.1.1项方法进行。

　　3.3.2 物理检查

　　3.3.2.1 外观

　　应为白色疏松体，按标示量加入所附疫苗稀释剂后应迅速复溶为澄明液体，无异物。

　　3.3.2.2 装量差异

　　依法检查（通则0102）（

（通则0102）），应符合规定。

　　3.3.3 化学检定

　　3.3.3.1 水分

　　应不高于3.0%（通则0832）（

（通则0832））。

　　3.3.3.2 pH值

　　依法测定（通则0631）（

（通则0631）），应符合批准的要求。

　　3.3.3.3 渗透压摩尔浓度

　　依法测定（通则0632）（

（通则0632）），应符合批准的要求。

　　3.3.3.4 多糖含量

　　称取1.0g琼脂糖，加至0.05mol/L巴比妥缓冲液（pH8.6）100ml中，加热溶解完全，待冷却至约56℃时分别加入适量的A群、C群、Y群和W135群脑膜炎奈瑟球菌抗血清，混匀后迅速倾倒于水平放置的约5.5cm×12.5cm玻板上。待琼脂凝固后打孔，孔径3mm，孔间距离4~5mm。各孔中分别加入稀释好的脑膜炎奈瑟球菌多糖参考品溶液（浓度分别为1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、6μg/ml、8μg/ml、10μg/ml、12μg/ml）和供试品溶液10μl。在60V恒压条件下电泳适宜时间。取出琼脂糖凝胶放入0.85%~0.90%氯化钠溶液内浸泡适宜时间后，用考马斯亮蓝染色液染色至火箭峰出现，用甲醇-醋酸溶液脱色至背景清晰。准确测量火箭峰高，将各群脑膜炎球菌多糖参考品含量及对应的峰高作直线回归分析，分别将供试品溶液电泳峰高度的值代入直线回归方程中，求出各群脑膜炎奈瑟球菌多糖的含量。

　　每1次人用剂量含A群、C群、Y群、W135群多糖应分别为35~65μg。

　　3.3.3.5 多糖分子大小分布测定

　　KD值均应不高于0.40。KD值小于0.5的洗脱液多糖回收率：A群多糖应大于76%，C群、Y群、W135群多糖应分别大于80%（通则3419）（

（通则3419））。

　　3.3.4 无菌检查

　　依法检查（通则1101）（

（通则1101）），应符合规定。

　　3.3.5 异常毒性检查

　　依法检查（通则1141）（

（通则1141）），应符合规定。注射剂量为每只小鼠0.5ml，含1次人用剂量；每只豚鼠5ml，含10次人用剂量。

　　3.3.6 热原检查

　　依法检查（通则1142）（

（通则1142））。注射剂量按家兔体重每1kg注射0.2μg多糖，应符合规定。

　　3.3.7 细菌内毒素检查

　　依法检查（通则1143）（

（通则1143）），每1次人用剂量应不超过1500EU。

　　4 稀释剂

　　稀释剂为灭菌注射用水或无菌、无热原PBS，稀释剂的生产应符合批准的要求。

　　灭菌注射用水应符合本版药典（二部）的相关规定。

　　无菌、无热原PBS应符合以下要求。

　　4.1 外观

　　应为无色澄清液体。

　　4.2 可见异物检查

　　依法检查（通则0904）（

（通则0904）），应符合规定。

　　4.3 pH值

　　应为6.8~7.2（通则0631）（

（通则0631））。

　　4.4 无菌检查

　　依法检查（通则1101）（

（通则1101）），应符合规定。

　　4.5 细菌内毒素检查

　　依法检查（通则1143）（

（通则1143）），应不高于0.25EU/ml。

　　5 保存、运输及有效期

　　于2~8℃避光保存和运输。自生产之日起，有效期为24个月。

　　6 使用说明

　　应符合“生物制品分包装及贮运管理”规定和批准的内容。