一、基本概念
药典和对无菌保证水平的定义
（1）最终灭菌产品：无菌保证水平不超过一百万分之一
（2）非最终灭菌产品：以培养基灌装零污染为目标，实际污染率低于
二、微生物基础
1、微生物及其特点
2、芽孢及其特点
（）当某些细菌遇到不良生存环境条件时，为保护自身，在细胞内形成一外壁厚而坚硬的休眠体，该休眠体即称芽孢（Spore ）或孢子。
（）对不良环境如热、化学消毒剂的耐受性远高于生长态细胞。
（）耐热
80 ℃ 下长期存活
100 ℃ 下有相当高的存活率
100 ℃ 以上死亡过程符合一级动力学方程
（4）影响芽孢耐热性的因素
芽孢存在的介质
受热时的湿度
三、热对微生物的作用：
当高温破坏了细胞中起生命作用的蛋白质、酶及核酸时，细胞死亡。
实验证明微生物受热死亡速度符合一级动力学方程，简称对数规则。
四、热力学灭菌相关指标概念：
五、不同灭菌温度下的灭菌率
1、灭菌率：为达到与某一温度下灭菌1 分钟相同的灭菌效果，在℃ 下灭菌所需要的灭菌时间
2、100 ℃ 灭菌时1 分钟，相当于1210.008 分钟，即Fo 值为分钟
3、105 ℃ 灭菌40 分钟时，Fo 约为 1分钟，能使D 值为1 分钟的芽孢数量下降个对数单位
六、
1、“ 每批产品中，污染品概率不得超过一百万分之一”，无菌的这一量化标准应当可以用试验来证明的。用无菌检查法显然是不可能的。
2、然而，每瓶产品微生物存活的概率却可计算的。
3、这就需要测试产品灭菌前微生物污染数、D 值，使用对数规则，并用生物指示剂试验来证实。
4、量化指标 + 计算 + 试验，使无菌标准成为工业界可执行的标准。
七、无菌保证水平举例
1、假定灭菌开始时产品中的污染微生物总数（N0 ）为100cfu/ 瓶，污染微生物的耐热参数（D ）为1分钟，要达到药典规定的SAL 的标准，灭菌F 0
值应达到多少？相当于℃ 和115 ℃ 下灭菌多少分钟？
答： F 0 = （-lgSAL ＋lgN 0 ） ×D = （6+ lg100 ） ×1= 8分钟 ，需在121 ℃ 下灭菌8 分钟。
换算成115 ℃ 下的灭菌时间是：
F 0 /L115=8/0.25=32 分钟。
2、 某复方氨基酸注射液采用110 ℃ ，30 分钟的灭菌程序，起始污染微生物仍为100cfu/ 瓶，D 值为0.5 分钟，请计算无菌保证值和残存微生物污染的概率。
答：-lgSAL= F0/D - lgN0 = L110 ×t /D - lg100= 0.08 ×30/0.5-2 = 2.8
残存微生物的概率SAL 为10 ^-2.8 ＝0.00158
通过无菌检查的概率为(1-0.00158) ^20 =0.969
