(2)取维生素D测定法(通则 0722第二法)中的供试品溶液B或收集净化用色谱柱系统中的维生素D流出液,用无氧氮气吹干,加流动相少许溶解,作为供试品溶液;另取等量的维生素D2与维生素D3对照品,用流动相稀释制成各约相当于5~10单位的混合溶液,作为对照品溶液。照高效液相色谱法(通则 0512)试验,用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以甲醇-乙腈(3:97)为流动相,检测波长为254nm。取对照品溶液20μl注入液相色谱仪,记录色谱图,维生素D2峰与维生素D3峰的分离度应大于1.0。再取供试品溶液20μl注入液相色谱仪,记录色谱图,供试品溶液色谱图中应有与对照品溶液相应的维生素D2主峰或维生素D3主峰保留时间一致的色谱峰。