欢迎访问『 博普智库 』制药人必备知识工具
质量管理 质量管理其他

薄层色谱的常见问题及常用显色剂

&n
评分 评分评分评分评分评分
阅读 8261 收藏 15 赞同 27
手机端查看
使用微信 “扫一扫” 即可在手机上查看

薄层色谱的常见问题及常用显色剂

将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层。待点样、展开后,根据比移值(Rf)与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值(Rf)作对比,用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。
薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,也用于跟踪反应进程。与其他色谱方法不同,TLC过程流动相一般不使用动力源,而是依靠毛细作用移动。
在TLC的使用中,若干的常见问题应该怎么解决呢?如何解决TLC中样品拖尾现象?
1.一些具有酸碱性的化学成分,在溶液中部分电离,事实上展开时存在分子、离子两种状态,以中性的有机试剂展开必然会出现两种层析行为,造成脱尾甚至是一条线
a 在展开剂中加几滴甲酸或冰醋酸
b 展开时以氨水饱和
2.展开剂选择不当
参考文献,调整展开剂种类比例
3.点样量过大
稀释样品,减少点样量薄层板为何要进行“活化”?
吸附剂的活性和含水量有密切关系,含水较多,吸附能力就大为减弱,因此通常总把吸附剂在一定温度下烘一定时间,以驱除水分,增强吸附能力,改善薄层板的分离效果,即所谓的“活化”。
药典活化110度,30分钟点样的要求是什么,为什么要这样做?
点样时用玻璃毛细管吸取试液适量,垂直地轻微接触薄层板表面(注意防止损坏硅胶层)。
样品溶液扩展开来的斑点直径应小于5mm,两相邻斑点中心间距应大于15mm。若斑点易扩散,则可先点上少许试液,待斑点干后,再点第二次,因为点样斑点大,会引起分离后的斑点扩散,影响展开后的分离度。若二斑点中心间距太小,展开中可能产生相邻斑点的相互重叠。
点样点的起始线应在距玻璃板底边2cm处,防止因点样太低而原点直接浸入展开剂中。点样斑点离板边距离应大于1.5cm,否则会因边缘溶剂的挥发,使斑点随之偏离而产生边缘效应。层析缸为何要先用展开剂饱和?
若层析缸未先为展开剂饱和,则由于展开剂中各种溶剂的挥发度不同,在层析过程中,随着展开剂的不断挥发,会使缸内展开剂组成不断改变,而使展开剂的极性发生改变,从而使各种组分的Rf值发生改变,分离受到影响。通用显色剂
0110%硫酸乙醇
10ml浓硫酸+90ml100%乙醇
02硫酸香草醛
20ml硫酸+20ml乙醇与5g香兰素/40ml乙醇混合
0.2g香兰素+10ml硫酸
0.1g香兰素+10ml盐酸
035%硫酸香草醛
先配制5-10%的硫酸-乙醇溶液,等溶液降至室温后,再将香草醛(0.5-1.0%G/V)加入到溶液中,溶解摇均就可以用了
香草醛试液要注意低温避光,使用时间不宜过长,至少每一个月要重配一次.
04碘熏
密封避光保存碘
发布于 2020-05-12 11:06:52 © 著作权归作者所有
评分
评论
27
收藏
更多